测序送样要求
CE 测序
Sanger测序
| 样本类型 | 基本要求 | 其他要求 | 保存/运输条件 | 预处理说明 |
| PCR产物 (已纯化/未纯化) |
样本量： >=30 μl（未纯化） >=10 μl（已纯化） 浓度： >=100 ng/μl（未纯化） >=20 ng/μl（已纯化） 纯度： OD260/2801.8~2.0 |
片段长度>=200 bp（如长度<200 bp,建议克隆后再测序） 送样前建议取3 μl样品电泳,能清晰检出单一明亮目的条带 建议自带测序引物 | 4°C 冷藏运输 | 超过30分钟需进行细胞冻存,冻存方法:细胞数目≥10万进行冻存(冻存液配制:90% FBS+10% DMSO)冻存液重悬混匀,放入冻存管中,梯度降温盒保存,使用足量干冰运输 |
| 质粒 | 样本量：>=20 μl 浓度：>=100 ng/μl 纯度： OD260/280 1.8~2.0 |
有条件情况下建议提供200 μl含有相应质粒的菌液备用 需注明载体全称、插入目的片段长度、测序要求 | 液体质粒：4°C 冷藏运输 干粉质粒：常温运输 | |
| 菌样（菌液/ 平板菌落） |
样本量： >=200 μl（菌液) |
建议为过夜培养（12 h）的新鲜菌液 尽量为高拷贝质粒，如为低拷贝质粒，建议直接提供质粒 需注明培养基、载体名称、是否需要诱导及抗性类型（除氨苄和卡那抗性，其余需自备） |
4°C 冷藏运输 | 菌液请放入EP管中，用封口膜封口，避免交叉污染 平板菌落请圈选标记,加缓冲垫以防运输中破损 |
送样附带引物的要求
引物总量>=10 μl，浓度>=10 pmol/μl；随机引物（RAPD引物）、简并引物、长度<15 mer或>30 mer引物、有特殊标记的引物或不纯的引物均不能用于测序；
尽可能提供引物全序列、PCR退火温度等信息。
备注：生工生物提供200多种通用引物，详情请见 常用载体测序引物清单。
TA克隆测序
PCR产物
未纯化产物，样本量>=20 μl，浓度>=20 ng/μl；已纯化产物，样本量>=25 μl，浓度>=50 ng/μl；
纯度：OD260/280 1.8~2.0；送样前建议取3 μl样品电泳，能清晰检出单一明亮目的条带；
请在订单上备注PCR所用引物的序列，以便用于克隆结果的核对分析；请提供克隆片段的相关信息，包括名称、大小、样品是否带有“A”尾以及PCR产物类型；
4°C冷藏运输。
Cosmid/Fosmid/BAC末端测序
质粒
样品量>=20 μl，浓度>=100 ng/μl，总量>=1 μg，纯度 OD260/280 1.8~2.0；有条件情况下建议提供200 μl含有相应质粒的菌液备用；需注明载体全称、插入目的片段长度、测序要求；
液体质粒：4°C 冷藏运输，干粉质粒：常温运输；
菌样
样本量>=200 μl（菌液）;建议为过夜培养（12 h）的新鲜菌液，尽量为高拷贝质粒，如为低拷贝质粒，建议直接提供质粒；需注明培养基、载体名称、是否需要诱导及抗性类型（除氨苄和卡那抗性，其余需自备）；
4°冷藏运输；
菌液请放入EP管中，用封口膜封口，避免交叉污染；平板菌落请圈选标记，加缓冲垫以防运输中破损；
片段长度多态性CE检测
荧光标记的PCR产物/酶切的荧光标记DNA片段/荧光标记的DNA片段
未纯化产物，样本量>=20 μl，浓度>=20 ng/μl；已纯化产物，样本量>=25 μl，浓度>=50 ng/μl；纯度：OD260/280 1.8~2.0；
一定要是荧光标记的PCR产物样本，主要用Fam、Hex、Tamrad、Rox四种荧光标记；送样前建议取3 μl样品电泳，能清晰检出单一明亮目的条带；检测所使用的内参照为LIZ500，不需要额外提供，如自带请注明；
4°C冷藏运输
荧光标记的样本请务必避光，请使用棕色管或以锡箔纸完全包裹。
合规性一代测序服务
PCR产物、质粒、菌样
| 样本类型 | 基本要求 | 其他要求 | 保存/运输条件 | 预处理说明 |
| PCR产物 (已纯化/未纯化) |
样本量： >=30 μl（未纯化） >=10 μl（已纯化） 浓度： >=100 ng/μl（未纯化） >=20 ng/μl（已纯化） 纯度： OD260/2801.8~2.0 |
片段长度>=200 bp（如长度<200 bp,建议克隆后再测序） 送样前建议取3 μl样品电泳,能清晰检出单一明亮目的条带 建议自带测序引物 | 4°C 冷藏运输 | |
| 质粒 | 样本量：>=20 μl 浓度：>=100 ng/μl 纯度： OD260/280 1.8~2.0 |
有条件情况下建议提供200 μl含有相应质粒的菌液备用 需注明载体全称、插入目的片段长度、测序要求 | 液体质粒：4°C 冷藏运输 干粉质粒：常温运输 | |
| 菌样（菌液/ 平板菌落） |
样本量： >=200 μl（菌液) |
建议为过夜培养（12 h）的新鲜菌液 尽量为高拷贝质粒，如为低拷贝质粒，建议直接提供质粒 需注明培养基、载体名称、是否需要诱导及抗性类型（除氨苄和卡那抗性，其余需自备） |
4°C 冷藏运输 | 菌液请放入EP管中，用封口膜封口，避免交叉污染 平板菌落请圈选标记，加缓冲垫以防运输中破损 |
gDNA、cDNA
样本量≥10 μl，浓度≥20 ng/μl；4°冷藏运输；
其他样本
请致电：021-5707 2069，或发送邮件 seq@health.sangon.com 咨询样本要求。复杂序列测序
ITR测序
ITR Sequencing
质粒
样本量>=20 μl（每增加一个反应增加5 μl），样本浓度>=200 ng/μl，纯度 OD260/280≥1.8且OD260/230≥1.8；测序引物要求：扩增及测序引物距ITR结构200 bp以内，最优范围在80-200 bp，如需委托生工生物设计合成测序引物，需提供质粒全序列；
液体质粒4°C冷藏运输，干粉质粒可常温运输。
Poly（A/T）测序、常规复杂序列测序
质粒
样本浓度>=150 ng/μl，体积>=20 μl，以Nanodrop仪器为准，OD260/280>=1.8；如有可能，同时提供200 μl含有相应质粒的菌液备用；
引物要求：距离Poly结构200 bp以内，最优为80-200 bp;需注明载体全称和插入目的片段长度及测序要求；
4°C冷藏运输。