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体外诊断qPCR引物及探针

作为分子诊断qPCR试剂盒中的核心原料,引物及探针的质量对于样本靶标检测的准确性,qPCR引物及探针起到了极其关键的作用。而对于分子诊断的应用,需要对引物及探针的纯度、荧光强度和洁净度等一系列指标提出更高的要求。自以qPCR技术为基础的分子诊断应用在国内外兴起开始,生工生物即不断对生产工艺进行优化升级。目前,我们生产的引物及探针,已被国内外大量的分子诊断试剂盒生产商采用。

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我们的优势

  1.  专用于生产分子诊断应用产品的10万级洁净生产车间和实验室,其中上海总部获得获得了ISO 13485和GMP认证;
  2.   专门经过优化的HPLC_CE (IVD)纯化,在保证纯度的前提下,避免外源性污染;
  3.  可选择额外定制QC检测:qPCR 探针荧光检测、NTC检测及关键指标批次间差异检测;
  4.  建立周期性质量跟踪体系并定期出具质量跟踪报告。

订购信息

IVD qPCR引物

IVD qPCR Primers

包含一对正反义链,常规情况下不带修饰。IVD专用的 qPCR引物全部在符合医药诊断级的10万级洁净车间生产及纯化,可选择多种纯化方式,推荐专门针对IVD优化的HPLC_CE (IVD)纯化。

纯化方式 碱基范围 交付形态 包装形式 额外QC 合成周期
HPLC_CE (IVD) 11~59 mer 干粉
液体
管装
96孔板
384孔板
纯度(CE) 3~5工作日

备注:

*HPLC_CE (IVD)为推荐纯化方式,如需考虑成本,也可考虑ULTRAPAGE及标准HPLC纯化方式,如对引物纯度要求更高,则可选择2X HPLC纯化方式。选择这些纯化方式的引物均保证在符合医药诊断级的标准的10万级洁净车间内生产;

**如引物长度在碱基范围之外,请在订购前与技术支持进行咨询沟通。

IVD qPCR探针

IVD qPCR Probe

通常为一条双端分别修饰荧光和淬灭基团的单链DNA。IVD专用的 qPCR引物全部在符合医药诊断级的10万级洁净车间生产及纯化,推荐专门针对IVD优化的HPLC_CE (IVD)纯化,可在保证纯度的基础上有效避免外源性污染。

探针修饰方式及基团说明请查看IVD qPCR探针修饰基团说明

纯化方式 碱基范围 交付形态 包装形式 额外QC 合成周期
HPLC_CE (IVD) 11~40 mer 干粉
液体
管装
96孔板
384孔板
纯度(CE) ≤5工作日

备注:

*HPLC_CE (IVD)为推荐纯化方式,如需考虑成本,也可考虑标准HPLC纯化方式,如对引物纯度要求更高,则可选择2X HPLC。选择这些纯化方式的引物均保证按医药诊断级的标准在10万级洁净车间安排生产;

**如引物长度在碱基范围之外,请在订购前与技术支持进行咨询沟通。

质量控制

除标准质检外,针对于IVD qPCR应用的荧光探针,我们可以通过额外定制QC检测来给予进一步的质量保证。

  荧光值酶切增量(FLU):确保TaqMan探针、分子信标等常规双标记引物的荧光、淬灭基团功能完全正常。

酶切增量检测案例

对照组由于不含DNase I,双标记探针保持完整,荧光基团被淬灭,只检测到本底荧光值195.1;酶切组中

由于含有DNase I,双标记探针被水解,荧光基团脱离淬灭范围,检测到明显的荧光增强,荧光值达到

11486.9,为本底荧光的58.9倍,符合客户定制的质控标准。

  阳性模板对照检测(PTC):保证阳性靶标的扩增效率。

PTC扩增检测案例

配置阳性扩增体系,进行qPCR检测,检测扩增曲线、Ct值和荧光值;根据协议,一定浓度模板存在下,qPCR

实验结果应出现合理的Ct值、荧光值以及标准的扩增曲线。不同批次的引物探针应表现出相近的实验结果

  人源污染检测(HSC):避免引物污染有人gDNA。

HSC扩增检测案例

使用常规人源DNA对应的引物、探针,将待测Oligo作为模板,配制扩增体系,进行qPCR检测,检测扩增曲线

及对应Ct值。A:45个反应循环内扩增曲线呈平线,系统判断无Ct值,则说明引物探针纯净,无人源模板污染;

B:45个循环内,扩增曲线出现翘起,系统判断出Ct值,则说明引物探针有人源基因组DNA污染。

  无模板对照检测(NTC):杜绝阴性对照出现假阳性。

NTC扩增检测案例

将订单中引物探针配制为qPCR体系,使用水作为模板,进行探针法qPCR反应,通过反应的扩增曲线及系统记录Ct

值,判断引物探针中是否有模板污染。A:若45个循环内,扩增曲线为平线,系统判断无Ct值,则说明引物探针纯

净,无模板污染;B:若45个循环内,扩增曲线出现翘起,系统判断出Ct值,则说明引物探针有模板污染。

资源

文档下载
引物合成线下订购表(128 KB) 引物定制合成手册(12 MB)
工业产品手册(34 MB) 引物使用说明书(1 MB)
修饰基团说明手册(4 MB)

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