概述

该产品催化粘端或平端双链DNA或RNA中毗邻的5’ 磷酸基团和3’ 羟基末端之间形成磷酸二酯键。酶还可以修复双链DNA，RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但是该酶对单链核酸无酶活性。T4 DNA连接酶需要辅因子ATP

应用

粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性

使用说明

连接产物酶切前无需纯化，可将限制酶直接加入连接反应混合物中

组分

T4 DNA Ligase,10X T4 DNA Ligase Buffer

属性

描述	T4 DNA连接酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5’ 磷酸基团和3’ 羟基末端之间形成磷酸二酯键。酶还可以修复双链DNA，RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但是该酶对单链核酸无酶活性。T4 DNA连接酶需要辅因子ATP。
来源	含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
内含物	T4DNA连接酶，10X T4 DNA连接酶 Buffer
分子量	55.3 kDa，单体
单位定义	在ATP-PPi交换反应中，37°C、20分钟内将1 nmol[32PPi]转化为Norit可吸收形式所需要的酶量定义为1 U。
10X T4 DNA Ligase 缓冲液	400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP(pH7.8, 25°C)
保存缓冲液	20 mM Tris-HCl(pH7.5), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% (v/v) 甘油
用途	粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性。
抑制	当反应体系中NaCl或KCl的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA 连接酶活性。
失活	65°C加热10分钟或者70°C加热5分钟。