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Order NO. B600257
Apal I内切酶
英文名 Apal I
相关类别 限制性内切酶 储存 冷冻(-20℃)
Uniprot ID Apal I    
   
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B600257-0001 1 KU 现货
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产品描述

概述

该限制性内切酶识别5'-G↓TGCAC-3'的酶切位点,并在缓冲液Y中具有最佳活性;携带来自巴氏醋杆菌的apaLIR克隆基因的重组大肠杆菌,一般用于单双酶切。

特点

  • 所有酶都适用于通用的Single Buffer缓冲液,可在统一反应体系内任意组合,无需多次单酶切或更换酶切缓冲液,方便、稳定、快速、可精准切割载体。

应用

分子克隆等

使用说明

高酶浓度和非最佳缓冲液的使用可能导致星活性, 使用BSA时不要长时间孵育。 为了获得更高的活性,应将BSA加入到1X 反应混合物中至最终浓度为100 μg/ ml。

组分

1 KU/管ApalI,10X Buffer Y,10X Single buffer

属性

识别位点 5'-G↓TGCAC-3'
来源 携带来自巴氏醋杆菌的apaLIR克隆基因的重组大肠杆菌
最适缓冲液 10X Buffer Y(330 mM Tris-乙酸盐(pH 7.9),100 mM乙酸镁,660 mM乙酸钾,1 mg/mL BSA)
通用缓冲液 10X Single buffer
孵育 37°C
酶活定义 1 U酶是在1 h,37°C,总反应体积为50 μl 时水解1 μg λDNA所需的酶
储存 -20°C
储存条件 10 mM Tris-HCl(pH 7.5,25°C),50 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.2 mg/mL BSA,50%甘油
连接与重切 使用 10 倍酶量消化底物,回收酶切产物。在 22°C 下使用适量 T4 DNA 连接酶可以将超过 95%的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开超过 95%的连接产物
甲基化影响 dam甲基化不敏感, dcm甲基化不敏感,CpG甲基化敏感
热失活 在65°C加热20分钟失去活性
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