概述

热敏UDG酶可通过催化水解含有U-DNA位点DNA链的尿嘧啶糖苷键 (碱基切除),释放尿嘧啶并产生碱敏感的无嘧啶基位点 (AP-DNA),该酶可作用于含尿嘧啶的单链和双链DNA。

特点

• 热敏UDG酶对双链DNA的活性低于单链DNA。该酶对小的U-DNA寡核苷酸和dUMP有活性,但对RNA或正常的无尿嘧啶DNA无活性。由于热敏UDG酶无金属离子要求,所以该酶在Mg2+或EDTA的存在下是有活性的。

应用

催化产生AP-DNA,使用体外方法制备含尿嘧啶的DNA (U-DNA),提高定向诱变方法的效率,获得高度标记的寡核苷酸探针,消除DNA合成反应的PCR污染。

组分

Heat-labile Uracil-DNA Glycosylase (1 U/μl)

属性

单位定义	一个单位定义为在 37°C，60 分钟内完全降解 1 μg 纯化的单 链尿嘧啶 DNA（噬菌体 M13，大肠杆菌 CJ236dut-ung-中 生长）所需的热敏 UDG 酶的量。 酶储存液：20 mM Tris-HCl，pH 8.0（4°C）， 0.1 mM EDTA， 100 mM KCl，1 mM DTT，50%甘油，0.5%Nonidet，0.5% Tween-20。 在缺乏稳定剂的缓冲液 （例如PCR缓冲液：10 mM Tris-HCl， pH8.3，50 mM KCl，1.5 mM MgCl2）中，酶在升高温度时 可以被快速灭活。