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- 技术服务DNA合成常规引物合成体外诊断qPCR引物及探针NGS引物大规模Oligo合成预设计成品引物RNA合成化学合成siRNA服务化学合成miRNA服务体外转录服务基因合成全基因合成基因相关服务质粒制备服务一代测序服务CE 测序片段长度多态性CE检测合规性一代测序服务复杂序列测序高通量测序靶向捕获测序表观遗传测序单细胞测序基因组测序客户自备文库测序扩增子测序转录组测序KBSeq全质粒测序服务基因分析基因检测基因获取病毒包装与RNA干扰基因组改造基因芯片Illumina芯片服务平台Agilent芯片服务平台AffymetrixChip核酸与蛋白作用SELEX适配体文库筛选DNase I footprinting assay（DNase I足迹分析实验）EMSA 凝胶阻滞迁移电泳检测GST/RNA/DNA pull-downCUT＆Tag双荧光素酶报告基因检测多肽、蛋白制备与分析多肽合成蛋白表达与纯化蛋白质解析抗体制备与免疫学分析抗体定制免疫学相关服务细胞分析细胞培养细胞检测
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体外诊断qPCR引物及探针
作为分子诊断qPCR试剂盒中的核心原料， qPCR引物及探针的质量对于样本靶标检测的准确性，起到了极其关键的作用。而对于分子诊断的应用，对引物及探针的纯度、荧光强度和洁净度等一系列指标提出更高的要求。我们在常规荧光探针的基础上，开发了性能更好的DBQ系列双淬灭、SF系列亲水改性、SX系列荧光增强等高级荧光探针。自以qPCR技术为基础的分子诊断应用在国内外兴起开始，生工生物即不断对生产工艺进行优化升级。目前，我们生产的引物及探针，已被国内外大量的分子诊断试剂盒生产商采用。
我们的优势
- 上海、武汉和南京独立的IVD引物探针工厂，10万级生产车间，ISO9001和ISO13485认证；
- 专门经过优化的HPLC_CE (IVD)纯化，在保证纯度的前提下，避免外源性污染；
- 可选择额外定制QC检测：qPCR 探针荧光检测、NTC检测及关键指标批次间差异检测；
- 建立周期性质量跟踪体系并定期出具质量跟踪报告。
订购信息
IVD qPCR引物
IVD qPCR Primers
包含一对正反义链，常规情况下不带修饰。IVD专用的 qPCR引物全部在符合医药诊断级的10万级洁净车间生产及纯化，可选择多种纯化方式，推荐专门针对IVD优化的HPLC_CE (IVD)纯化。
| 纯化方式 | 碱基范围 | 交付形态 | 包装形式 | 额外QC | 合成周期 |
|---|---|---|---|---|---|
| HPLC HPLC_CE (IVD)* | 11~59 mer | 干粉 液体 | 管装 96孔板 384孔板 | 纯度（CE） | 3~5工作日 |
备注：
*HPLC_CE(IVD)为推荐纯化方式，如需考虑成本，也可考虑ULTRAPAGE及标准HPLC纯化方式，如对引物纯度要求更高，则可选择2X HPLC纯化方式。选择这些纯化方式的引物均保证在符合医药诊断级的标准的10万级洁净车间内生产；
**如引物长度在碱基范围之外，请在订购前与技术支持进行咨询沟通。
IVD qPCR探针
IVD qPCR Probe
通常为一条双端分别修饰荧光和淬灭基团的单链DNA，其中也包含具有双重淬灭保障的双淬灭荧光探针。我们更是在常规荧光探针的基础上，开发了性能更好的DBQ系列双淬灭、SF系列亲水改性、SX系列超级荧光等高级荧光探针。IVD专用的 qPCR引物全部在符合医药诊断级的10万级洁净车间生产及纯化，推荐专门针对IVD优化的HPLC_CE (IVD)纯化，可在保证纯度的基础上有效避免外源性污染。
探针修饰方式及基团说明请查看IVD qPCR探针修饰基团说明
| 纯化方式 | 碱基范围 | 交付形态 | 包装形式 | 额外QC | 合成周期 |
|---|---|---|---|---|---|
| HPLC HPLC_CE (IVD)* | 11~40 mer | 干粉 液体 | 管装 96孔板 384孔板 | 纯度（CE） | ≤5工作日 |
备注：
*HPLC_CE (IVD)为推荐纯化方式，如需考虑成本，也可考虑标准HPLC纯化方式，如对引物纯度要求更高，则可选择2X HPLC。选择这些纯化方式的引物均保证按医药诊断级的标准在10万级洁净车间安排生产；
**如引物长度在碱基范围之外，请在订购前与技术支持进行咨询沟通。
IVD qPCR 常规双端修饰荧光探针
| 探针类型 | 淬灭修饰基团 | 荧光修饰基团 | 特点 |
|---|---|---|---|
| BHQ系列荧光探针 | BHQ1/BHQ2/BHQ3 | 点击查看 IVD qPCR探针修饰基团说明 | 吸收光谱范围广，从430nm-730nm，通过BHQ1/BHQ2/BHQ3同系列三个淬灭基团，可搭配大多数的荧光基团，适用于多种检测 |
| MGB荧光探针 | MGB | 和传统探针比，相同长度的序列，可增加约10°C的Tm值，并稳定探针与靶标的复合物。因此，MGB探针明显短于传统探针，并且具有更好的检测特异性 | |
| TAMRA荧光探针 | TAMRA | 发射光谱广，其固有荧光产生背景信号，会潜在降低基于TAMRA检测的灵敏度。使用TAMRA作为淬灭剂的探针通常更长（30-40 nt）,不推荐在多重qPCR过程中使用 | |
| Eclipse荧光探针 | Eclipse | 本底信号更低，并且Eclipse具有较宽的吸光范围，适用于多重qPCR反应 | |
| Dabcyl分子信标探针 | Dabcyl | Dabcyl由于其吸光特性且无残留荧光，已被广泛用作诊断探针（如分子信标）中的淬灭剂 |
常规替代增强型高级荧光探针
| 探针类型 | 淬灭修饰基团 | 荧光修饰基团 | 特点 |
|---|---|---|---|
| DBQ系列双重淬灭探针 | DBQ1/DBQ2/DBQ3 | 点击查看 IVD qPCR探针修饰基团说明 | 在探针中间额外修饰了一个特殊淬灭基团，和3’的淬灭基团形成双重淬灭，能显著降低荧光本底信号，提高荧光增量。推荐替代BHQ系列，尤其适用于较长片段的探针序列。DBQ1/DBQ2/DBQ3可部分替代BHQ系列。 |
| SF系列亲水改性探针 | 点击查看 IVD qPCR探针修饰基团说明 | SF670/SF695/SF565 | 针对原始Cy系列水溶解性差的缺点，进行了亲水性改造，荧光强度得到显著提高。SF670、SF695和SF565可替代Cy5、Cy5.5和Cy3。 |
| SX系列荧光增强型探针 | SX670 | 和原始替代荧光基团相比，其荧光强度能得到倍数级的提高。目前已开发了SX670用于替代Cy5。 |
DBQ1双淬灭探针和BHQ1常规探针对比实验
在相同的测试条件和环境下，常规探针组均为FAM-BHQ1修饰，双淬灭探针组均为FAM-DBQ1修饰，采用HPLC纯化，此次实验使用ABI 7500检测qPCR，DBQ1双淬灭探针无论是本底和荧光增量均明显优化BHQ1
SF670荧光探针和Cy5荧光探针对比实验
在相同的实验条件下测试SF670与Cy5常规淬灭探针实验对照。均采用HPLC纯化，此次实验使用ABI 7500检测qPCR， SF670荧光探针，本底荧光比CY5低，荧光增量比CY5高
SX670荧光探针和Cy5荧光探针对比实验
在相同的实验条件下测试XS670与Cy5常规淬灭探针实验对照。均采用HPLC纯化，此次实验使用ABI 7500检测qPCR， SX670荧光探针，荧光增量比CY5极大提高
质量控制
除标准质检外，针对于IVD qPCR应用的荧光探针，我们可以通过额外定制QC检测来给予进一步的质量保证。
荧光值酶切增量（FLU）：确保TaqMan探针、分子信标等常规双标记引物的荧光、淬灭基团功能完全正常。
酶切增量检测案例
对照组由于不含DNase I，双标记探针保持完整，荧光基团被淬灭，只检测到本底荧光值195.1；酶切组中由于含有DNase I，双标记探针被水解，荧光基团脱离淬灭范围，检测到明显的荧光增强，荧光值达到11486.9，为本底荧光的58.9倍，符合客户定制的质控标准。
人源污染检测（HSC）：避免引物污染有人gDNA。
人源污染检测（HSC）案例
（使用常规人源DNA对应的引物、探针，将待测Oligo作为模板，配制扩增体系，进行qPCR检测，检测扩增曲线及对应Ct值。 A：45个反应循环内扩增曲线呈平线，系统判断无Ct值，则说明引物探针纯净，无人源模板污染； B：45个循环内，扩增曲线出现翘起，系统判断出Ct值，则说明引物探针有人源基因组DNA污染。
无模板对照检测（NTC）：杜绝阴性对照出现假阳性。
无模板对照检测（NTC）案例
（将订单中引物探针配制为qPCR体系，使用水作为模板，进行探针法qPCR反应，通过反应的扩增曲线及系统记录Ct值，判断引物探针中是否有模板污染。 A：若45个循环内，扩增曲线为平线，系统判断无Ct值，则说明引物探针纯净，无模板污染； B：若45个循环内，扩增曲线出现翘起，系统判断出Ct值，则说明引物探针有模板污染。）
订购方式
直接登录引物合成网购系统，自助进行常规DNA合成的定制；
在下方“资源>文档下载”区下载对应的服务订购表，发送邮件至synth@sangon.com ，由订单中心技术人员处理您的询价；
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