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高通量测序各平台简介

Hiseq 2500平台
Hiseq 2500是Illumina公司推出的一款新的高通量测序仪,测序通量可达1TB/run,一次运行可独立测试16个lane。HiSeq 2500的测序原理和Genome Analyzer相同,采用稳定的可逆终止法边合成边测序技术。该技术使用4种含有末端阻断基团和不同荧光信号的碱基进行模板互补链的合成,在光学系统和制造工艺方面,采用2个激光源对Flowcell进行扫描,并使用4台照相机对4种碱基分别进行记录,大幅度减少了不同碱基之间的信号干扰;同时,HiSeq 2500使用了新颖的双表面成像技术,从而提高测序产量。
Miseq平台
Illumina在2011年推出了个人型测序平台——MiSeq系统。MiSeq个人测序系统采用Illumina的TruSeq?边合成边测序技术。MiSeq系统特有全新的射流结构,能使试剂循环时间缩短5倍。由于时间缩短,加上试剂优化,可以达到2X250 bp的测序长度,该长度对基因组测序起了极大的推动作用。MiSeq内置了电脑显示屏及其操作界面、簇生成、测序仪、数据存储以及数据分析软件,用户无需配备其它仪器和软件。操作极简单,数据直接输出,特别适合医学领域和科研实验室的客户使用。
ION TORRENT平台
Ion Torrent是新推出的测序技术,它的核心技术是使用IS-FET半导体技术将生化反应与电流强度直接联系。在聚合酶反应,每聚合一个碱基,释放出氢离子,H离子的释放引起周围环境的PH变化,PH变化能够被IS-FET场效应管感应引起电流的变化,记录电流信号,读出AGCT的测序序列。Ion Torrent硬件设备无需激光等光学检测和CCD扫描系统,并且使用天然核苷酸和聚合酶、无需焦磷酸酶化学级联、无需标记荧光染料和化学发光的配套试剂,因此测序时间非常短、测序成本成本低,其应用范围涵盖已有高通量测序技术的应用领域,如基因组DNA测定(微生物基因组测序、线粒体测序、靶向测序)、microRNA测序、宏基因组测序、转录组测序等。