概述

该ELISA通用试剂盒主要用于HRP标记抗原抗体对的检测。

特点

• 1. 操作简便：无需太多准备，拿到试剂盒既能开展试验。 2. 应用广泛：适用于多种靶蛋白的抗原抗体对ELISA检测。

使用说明

1. 包被：用包被缓冲液将抗原稀释至1 μg/mL, 按100 μL/孔加入酶标板，即每孔蛋白包被量建议为0.1 μg，多肽包被量建议为1 μg，37 °C孵育1.5小时左右。 2. 洗板：弃去孔内液体，在滤纸上轻轻扣打以吸去残留液体，每孔加入300 μL洗涤缓冲液（1×）浸泡5分钟，清洗3次。 3. 封闭：每孔加入200 μL封闭缓冲液，37 °C孵育1.5小时左右。 4. 洗板：弃去孔内液体，在滤纸上轻轻扣打以吸去残留液体，每孔加入300 μL洗涤缓冲液（1×）浸泡5分钟，清洗2次。
5. 孵育HRP标记抗体：用抗体稀释液稀释抗体。每孔加入100 μL新稀释后的酶标抗体（可梯度稀释），37 °C孵肓1小时。同时可设置空白孔、阴性对照孔和阳性对照孔，空白孔加入100 μL抗体稀释液替代酶标抗体，阴性对照孔可加入100 μL与抗体同种属IgG，阳性对照孔可加入100 μL确定能与抗原结合的酶标抗体。
6. 洗板：弃去孔内液体，在滤纸上轻轻扣打以吸去残留液体，每孔加入300 μL洗涤缓冲液（1×）浸泡5分钟，清洗3次。
7. 显色：根据使用量将显色液A和显色液B按1：1混匀，每孔加入100 μL混匀后显色液，室温避光反应5-10分钟。
8. 终止显色：每孔加入100 μL終止液。即刻用酶标仪450 nm波长下测量OD值（5 min内）。
9. 结果判断：一般检测孔的OD值大于阴性孔OD值的2.5倍，则判定为阳性。

组分

酶标板， 包被缓冲液， 浓缩洗涤液（10×）， 脱脂奶粉， 显色液A， 显色液B， 终止液