概述

亲和纯化抗体试剂盒是将特异性抗原（自备）结合到凝胶微球上，再通过抗原和抗体的特异性结合，用来纯化血清中的抗体。

特点

• 1. 效率高。
• 2. 速度快。
• 3. 使用方便。
• 4. 可纯化10 ml血清。

使用说明

※ 纯化前请先准备好1-3 mg特异性抗原。
1. 4 ℃过夜预冷活化缓冲液。
2. 将筛板放入纯化柱底部，去除纯化柱下盖，加入1ml凝胶微球，保存液直接流出丢弃，每次加入10 ml预冷的活化液，盖上纯化柱下盖，4 ℃放置15 min，去除纯化柱下盖，活化液直接流出丢弃，重复4次，以充分活化凝胶微球，活化后盖上纯化柱下盖。
3. 加入1-3 mg特异性抗原溶液。
4. 加入偶联液5 ml，盖上纯化柱上盖，并用封口膜缠绕封口，置于旋转摇床上室温孵育4 h。
5. 去除纯化柱下盖，流出偶联液，用10 ml洗涤液冲洗。冲洗后盖上纯化柱下盖。
6. 加入封闭液5 ml，置于旋转摇床上室温孵育4 h或4℃过夜。
7. 去除纯化柱下盖，流出封闭液，用10 ml洗涤液冲洗。冲洗后盖上纯化柱下盖。
8. 再加入一个筛板，形成2个筛板和凝胶微球的夹心结构。
9. 加入10 ml血清，去除纯化柱下盖，使血清自然流出纯化柱，收集流穿液。将流穿液再次加入纯化柱中，重复10次，其中每2次后用5 ml洗涤液冲洗一次柱子，弃去流出的洗涤液。收集最后一次的流穿液，以防止抗体未结合。
10. 用10 ml 洗涤液冲洗。冲洗后盖上纯化柱下盖。
11. 加入5 ml预洗脱液洗脱一次，弃去流穿液。
12. 加入10 ml洗脱液，得到的流穿液即为抗体。每支抗体收集管中预先加入50 μl收集液，每管接1 ml流穿液。
13. ELISA检测各管抗体的效价，保留效价最高的2-3 ml抗体。
14. 抗体长期保存可加入40%甘油和0.05%叠氮钠，-20℃~-80℃保存。

组分

活化液 凝胶微球 纯化柱 筛板 偶联液 洗涤液（10x） 封闭液 预洗脱液 洗脱液 收集液