概述

本试剂盒提供快速而简单的偶联过程，FITC是目前常用的荧光染料之一，通过抗体或蛋白的伯胺（即赖氨酸残基）与FITC的硫碳胺基结合，形成FITC-蛋白质结合物，即FITC标记抗体或蛋白。标记抗体或蛋白可应用于ELISA，Western blot，IF和 FACS分析等。

特点

• 1. 标记过程简单迅速。
• 2. 提供了 FITC 标记所需全部试剂。
• 3. 每次可标记1-5mg的抗体。
• 4. 经脱盐柱离心可得到高纯度的偶联产物。

使用说明

1. 取0.5 ml（1mg）待偶联抗体装入离心管中，加入150 μl稀释后的FITC溶液，迅速混匀。
注：抗体若为粉末，直接用0.5 ml FITC偶联缓冲液溶解1mg抗体。若为液体，如果浓度较低，可先进行超滤浓缩，再用FITC偶联缓冲液补足体积到0.5 ml。
2. 37°C避光反应90 min。
3. 标记脱盐柱的一端并确保在离心期间标记一直朝外。
4. 将脱盐柱离心：1000 g离心1 min，以压实树脂。
5. 取下柱顶盖和底盖，放入15 ml离心管中，1000 g离心2 min以除去储存缓冲液。
6. 加入0.5-1 ml FITC偶联缓冲液到柱中（脱盐柱的上样体积范围为0.3-0.9 ml），1000 g离心2 min以除去储存缓冲液。
7. 重复上一步骤五次，每次离心过后弃掉下层液体。
8. 将脱盐柱放入新的离心管中，将偶联产物缓慢滴加到树脂中间，1000 g离心6 min收集离心管中的溶液即为FITC标记的抗体。

组分

FITC，FITC稀释液，FITC偶联缓冲液，脱盐柱