概述

本试剂盒是以过碘酸盐活化辣根过氧化物酶（HRP），活化的过氧化物酶通过席夫碱与抗体或蛋白上的伯胺交联，再还原席夫碱产生稳定的偶联产物。

特点

• 1. 可偶联0.75-3mg的抗体或蛋白，最佳的偶联量为1mg。
• 2. 经透析和浓缩提高偶联效率和产物纯度。

使用说明

1. 取500 μl HRP溶液于5 ml离心管中，加入200 μl HRP活化缓冲液，在旋转混悬仪上，室温缓慢反应30分钟。
2. 加入200 μl HRP偶联缓冲液，静置30分钟，溶液缓慢变回棕黄色。
3. 加入1 mg需偶联的目的蛋白（体积控制在1 ml左右），用移液器轻轻混匀后，将液体转移到透析袋中，先用透析夹固定透析袋的一端，装入液体后再固定另一端，最后将透析袋置于2 L偶联透析液中，将装有透析液的容器置于磁力搅拌器上室温透析2小时，或4℃透析过夜。
4. 透析后，将透析袋中液体转移到5 ml离心管中，加入100 μl还原剂，室温静置2小时，间隔半小时用移液器轻轻混匀2-3次。至此偶联实验已完成。
5. 如果需要高浓度的偶联产物，将第4步液体转移到透析袋中，直接覆盖浓缩剂，一般浓缩10分钟至半小时，也可根据实际需求调整浓缩时间。

组分

HRP，HRP活化缓冲液，HRP偶联缓冲液，偶联透析液，还原剂，透析袋，透析夹，浓缩剂（选用）