概述

该介质的基质为平均粒径90 μm的6%高度交联琼脂糖，通过化学方法将亚氨基二乙酸（IDA）分子固定于琼脂糖表面羟基，再由IDA络合金属Ni2+而制成。纯化原理是基于重组蛋白组氨酸标签的咪唑环可与过渡态金属Ni2+离子形成稳定的化学配位键，因此能特异、牢固、可逆地吸附于固定有这些金属离子的琼脂糖基质。

特点

• 1.相比三价金属离子螯合剂亚氨基二乙酸制成的Ni-IDA-琼脂糖，Ni-NTA-琼脂糖的非特异性吸附明显减少，可让使用者获得更高纯度的目标蛋白; 2.支持变性包涵体蛋白的柱上复性，起到分离、复性同步进行的效果; 3.可耐受一定浓度的还原试剂（β-巯基乙醇最高可用到20 mM）; 4.琼脂糖基质在pH 2~14范围内保持稳定，可耐受反复在位清洗（CIP）; 5. 纯化过程中极少的Ni2+渗漏; 6. 可以反复使用和再生5~10次。

应用

用于各种表达来源（如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等）的His标签蛋白的纯化。

组分

5 mL (1/5/10 columns)

适用样本

His标签蛋白

属性

注意事项	填料不可冻存，EDTA，EGTA，柠檬酸，组氨酸等影响因子会影响标签蛋白与树脂的结合。
保存缓冲液	20%乙醇
运输条件	冰袋运输
树脂类型	6%琼脂糖
树脂容量	5 ml (1/5/10 columns)
载量	约 10~40 mg 组氨酸标签蛋白/1 ml 树脂
粒径范围	45-165 μm
pH 稳定性（长期）	4~13
pH 稳定性（短期）	2~14
化学稳定性	常用的水相缓冲液; 1 mol/L 氢氧化钠; 2% SDS; 70% 醋酸; 30%异丙醇，0.5~1 mM DTT，20 mM β-mercaptoethanol
物理稳定性	基质耐热（pH7水中，30min，120°C）
最大压力	0.3 MPa, 3 bar
最大线性流速	150 cm/h
推荐流速	0.01 Mpa/cm柱高,20 - 40 cm/h