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Order NO. B540194
pPIC9K 毕赤酵母表达载体
英文名 pPIC9K DNA
相关类别 载体与菌株 储存 冷冻(-20℃)
   
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B540194-0001 10 UG 现货
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产品描述

概述

pPIC9K载体中存在卡那抗性基因,允许利用卡那抗性在酵母体内筛选多克隆拷贝,载体其余部分与pPIC9载体完全一样。pPIC9K载体能够使用的毕赤酵母宿主菌是KM71和GS115。 pPIC9K载体详细信息如下: ? pPIC9载体大小9276 bp,是融合表达载体。 ? 载体构建过程中,可供使用的单一限制性内切酶位点为SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I. ? 利用alpha因子分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。 ? 在载体构建过程中,你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。 ? 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。 ? 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) ? 为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) ? 将基因插入GS115的AOX1区域,需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。

技术规格

质粒类型 毕赤酵母表达载体
启动子 AOX1
表达水平
克隆方法 多克隆位点,限制性内切酶
载体大小 9276bp
5'测序引物及序列 5′ AOX1:5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3′ alpha-Factor-F: 5′-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3′
3'测序引物及序列 3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′
载体标签 N-alpha factor
载体抗性 氨苄青霉素(Ampicillin)
筛选标记 HIS4
备注 利用alpha分泌因子,分泌表达蛋白
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