概述

本试剂提供了进行简便,灵敏和防污染的PCR检测系统。核心试剂包含了化学修饰热启动酶 (Hotstart HiTaq DNA polymerase),UDG酶 (Uracil-DNA Glycosylase),MgCl2溶液,经过优化的缓冲液和优化比例的dUTP/dNTP Mix。 UDG的作用原理：在PCR反应前50°C,2 min反应中,UDG酶可水解PCR反应液中含有尿嘧啶的PCR产物的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。随后进行95°C,10 min热处理,在UDG酶失活的同时进一步对磷酸骨架水解,从而消除含有尿嘧啶的PCR产物的污染。UDG酶可以作用于单链或双链DNA,对RNA无活性。

特点

• 只需加入适量的引物和探针或荧光染料,即可进行荧光PCR检测。在PCR反应前加入UDG可降解含有尿嘧啶的PCR产物,而对不含尿嘧啶的模板无任何影响,可选择性水解含有尿嘧啶的PCR产物。在反应中Hotstart HiTaq DNA polymerase的加入使得反应具有极强的特异性和高度灵敏度。

应用

荧光定量PCR

组分

Hotstart HiTaq Master PCR Mix,5X Hotstart HiTaq Reaction Buffer (Mg2+浓度2.5 mM)