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EMSA 凝胶阻滞迁移电泳检测

服务简介

凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA/RNA结合蛋白和其相关的DNA/RNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理,当转录因子与特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。

主要流程

标准蛋白样品制备与定量 探针设计合成 蛋白与探针等进行反应 SDS-PAGE电泳 紫外胶联 杂交孵育 图片扫描

订购信息

服务项目

说明

周期

报价

生物素标记探针设计与制备

客户提供结合基因序列或参考文献来分析设计合成,生物素标记法为经典EMSA方法

1~2周

详细

荧光标记探针

利用近红外荧光标记探与蛋白结合在凝胶板上通过近红外扫描仪直接测定电泳位置

1~2周

蛋白标准样品的制备与浓度精确测定

蛋白样品制备要现配现用,

1~2周

EMSA 凝胶电泳迁移检测

1个探针和1个蛋白做一个EMSA反应(5条泳道,包括1条free probe泳道,3条蛋白梯度泳道;1条特异性竞争泳道)

3~5工作日

结合蛋白的纯化与质谱检测(未知蛋白需要检测)

条带切胶蛋白纯化,质谱检测进行肽段检索与聚类分析

1周

客户提供

提供样品
1) 细胞(>2 × 107);
2) 目的蛋白一抗及相关试剂盒;
3) 预测核酸作用基因序列;
4) 阳性对照样品(尽量提供)
5) 有相关文献请提供。
交付结果
1) 探针设计合成信息;
2) 原始数据、结果图片;
3) 完整的实验报告(含实验步骤、流程及试剂耗材厂家)