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SELEX适配体文库筛选

服务简介

SELEX技术即指数富集的配基系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)。利用该技术可以从随机单链核酸序列库中筛选出特异性与靶物质高度亲和的核酸适体 (Aptamer)。SELEX技术的基本思想是体外化学合成一个单链寡核苷酸库,用它与靶物质混合,通过重复的筛选与扩增,洗去与靶物质不结合或与靶物质有高亲和力外的核酸分子,分离纯化与靶物质高度亲和的核酸适体。SELEX技术及核酸适体具有库容量大,适应范围广泛;分辨率高,实用性强;亲和力高;筛选过程相对简便、快速、经济;适配子体积小等优势。该技术体外诊断和体内治疗及药物的开发等方面都具有应用。

主要流程

SSDNA文库合成 与靶标结合分析 洗脱 纯化(以上2~3步骤重复) PCR扩增 克隆测序

订购信息

服务项目

说明

周期

报价

SSDNA文库合成

合成两段固定序列蹭机序列的DNA单链文库

3个工作日

详细

SSDNA与靶标蛋白结合筛选

通过亲和力结合与洗脱重复筛选,得到亲和力最高适配体

3~4周

PCR扩增与克隆测序

通过测序得到适配估的DNA序列

1~2周

客户提供

提供样品

蛋白质类靶标——可为蛋白质溶液/冻干粉/表达在细胞表面的蛋白质分子:
1) 如为蛋白质溶液提供50 μg纯度>99%的蛋白质;
2) 告之蛋白质的确切名称,并附上该蛋白相关说明及生物或环境安全的相关信息;
3) 如为表达在细胞表面的蛋白质分子,请提供表达该蛋白的细胞和空宿主细胞;由于筛选过程中需要活细胞,我们将为此种样品提供短时的细胞培养服务(另收费),客户可提供配制500 ml培养基所需的材料。
其它小分子物质靶标:
1) 提供50 μg小分子与载体的偶联物(附偶联率检测报告);
2) 小分子的确切名称,并附上生物或环境安全的相关信息;
3) 提供游离的小分子物质(溶液或固体,视具体物质而定)。

最终交付

交付成品
1) 能够与靶标结合,序列各异且亲和力(Kd)在10-8~10-10 nmol/L的核酸适体单克隆若干(视最终测序结果);
2) 带有核酸适体(载体)单克隆的大肠杆菌菌液;
交付报告
1) 核酸适体亲和力检测(毛细管电泳法)结果;
2) 对应核酸适体单克隆测序的峰图;
3) 完整的实验报告(实验步骤、筛选过程中的富集率数据及相关的照片等)。